天然维生素A主要是全反式维生素A。
性质:具紫外吸收,易氧化变质,能与三氯化锑呈色,与氯仿、乙醚、环己烷或是由醚任意混合,在乙醇中微溶,在水中不溶。
鉴别试验:
①三氯化锑反应(Carr-price反应):维生素A在饱和无水三氯化锑的无醇氯仿溶液中,即显蓝色,渐变成紫红色。
②紫外吸收光谱:维生素A分子中含有5个共轭双键,其无水乙醇溶液在波长326nm处有最大吸收。当在演算催化下加热,则发生去水反应而生成脱水维生素A。后者比维生素A多一个共轭双键,使其最大吸收峰红移,同时在350~390nm波长范围内出现3个最大吸收峰。
③薄层色谱:以硅胶G为吸附剂,环己烷-乙醚(80:20)为流动相。
含量测定:紫外分光光度法(三点校正法)
原理:本法是在三个波长处测定吸收度,根据校正公式计算吸收度A校正值后,再计算含量,故本法亦称“三点校正法”。原理如下:
①杂质的吸收在310~340nm波长范围内呈一条直线,且随波长的增大,吸收度变小。
②物质对光的吸收具有加和性。
三点波长的选择法:
①第1点:选择维生素A的最大吸收波长(即λ1)。
②第2点和第3点:在最大吸收波长的两侧各选一点(即λ2和λ3)。
等波长差法:在λ1的左右各选一点为λ2和λ3,使λ3—λ1=λ1—λ2。维生素A醋酸酯。
等吸收法:在λ1的左右各选一点为λ2和λ3,使Aλ2=Aλ3=6/7Aλ1。维生素A醇。
③杂质吸收:对维生素A的测定有影响的杂质主要有:
维生素A2和维生素A3;维生素A的氧化产物(环氧化物、维生素A醛和维生素A酸);维生素A在光照下产生的无生物活性的聚合物鲸醇。
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